免疫学
IVD研发
分子生物学
1.普通PCR技术服务
服务要求:
1、请您提供新鲜的且尽量多的样品(不少于100mg/样品),或直接提供纯化好的总DNA(大于5ug/样品)。2、提供已知的全长基因序列。3、请提供详细背景资料:DNA来源、丰度等
服务过程
及提交结果:
步骤:1)根据基因序列设计特异性的引物;2)提取DNA;3)PCR,实验分析;4)提供完整的实验报告(含电泳图)及引物等实验材料;
时间:
一周
服务费用
(元):
1)DNA提取费用:120元/个;三个以上80元/个;2)PCR反应费用:单指标150元;三个指标以上80元/个;3)引物设计,引物合成均免费赠送。
2.转化服务
服务要求:
质粒转化:请您提供质粒,并说明质粒的大小、浓度、抗性以及拷贝数等背景资料,最好可以提供质粒图谱。提交结果:涂布后的平板。
服务过程
及提交结果:
酵母转化:请您提供酶切消化好的线形DNA(已纯化)、电击细胞、平板。提交结果:涂布后的平板(依照您的要求选择涂板量)
时间:
质粒转化:2天 || 酵母转化:5天
服务费用
(元):
质粒转化:80元/个 || 酵母转化:250元/个(500元/个,点击细胞和平板由我们提供;)
3.重组蛋白:大肠杆菌表达系统
服务要求:
1)目的基因来源为人工合成基因片段、文库筛选得到的克隆、PCR产物等。2)请提供目的DNA片段的序列信息。如客户提供特殊载体,请提供抗性、多克隆位点、纯化tag测序引物等信息。
服务过程
及提交结果:
1)按照客户要求构建表达载体,并测序验证序列正确。2)转化目的菌株,筛选阳性克隆并按照诱导表达程序诱导目的蛋白表达。3)通过蛋白电泳和westonblot(客户提供抗体)验证蛋白表达并标示重组蛋白存在状态。包涵体复性(如重组蛋白存在状态为包涵体)并柱层析纯化小量重组蛋白。
时间:
30工作日
服务费用
(元):
通用表达载体:15000元;客户提供表达载体:15000元。
4.重组蛋白:酵母表达系统
服务要求:
1)目的基因来源为人工合成基因片段、文库筛选得到的克隆、PCR产物等。2)请提供目的DNA片段的序列信息。如客户提供特殊载体,请提供抗性、多克隆位点、纯化tag测序引物等信息。
服务过程
及提交结果:
1)按照客户要求构建表达载体,根据目的重组蛋白特性设计胞内表达或分泌表达方案,测序验证序列是否正确。2)转化目的菌株,筛选阳性克隆并按照筛选程序进行抗性梯度筛选,从中选出0.1%-1%高表达菌株,通过southernblot分析插入位点和拷贝数,按照诱导表达程序诱导目的蛋白表达。3)通过蛋白电泳和Western Blot验证蛋白表达并标示重组蛋白存在状态。4)柱层析纯化小量重组蛋白并提供1mg样品;5)设计发酵条件并进行初步优化,服务结束后提供全部图片资料和实验记录资料。
时间:
90天
服务费用
(元):
细胞内表达:30000元;分泌型表达:45000元。
5.克隆构建
服务费用
(元):
<1KB 2000元,1KB~2KB 4000元,>2KB 6000元
6.基因克隆技术
服务要求:
1)亚克隆服务:A客户提供模板。将gene片断从质粒1中克隆到质粒2中; B客户提供模板,将gene1片断通过pcr等方法,进行客户所需要的修饰(如点突变,加尾等)成为gene2,然后克隆到质粒2中;2)新基因克隆:A基因序列已知,客户提供基因名称,或者序列号,经我公司查询和客户确认后,克隆基因到目的载体;客户还需提供cDNA模板或者组织、细胞等材料;B.基因序列未知,在新物种中克隆,客户提供基因名称,相关物种该基因的描述。客户还需提供cDNA模板或者组织、细胞等材料;
时间:
一周
服务费用
(元):
暂定:5000元/种
7.质粒抽提
服务要求:
提供甘油或穿刺保存菌种,请确保菌体活力较高,或将重新活化后的菌种
服务过程
及提交结果:
实验报告(包括质粒电泳照片、鉴定结果及OD值测定结果,1.7<OD280/OD260<2.0的质粒,穿刺保存菌种;
时间:
一周
服务费用
(元):
普通质粒:150/50ug;超纯质粒:300/50ug; 无内毒素质粒:300/50ug;
8.分子杂交服务
服务过程
及提交结果:
1.原位杂交;2.斑点杂交;3.Southern杂交;4. Northern杂交